亚洲开发银行大湄公河次区域合作项目自1992年起开始实施，经过初期规划、项目选择，现已进入项目实施阶段。亚洲开发银行大湄公河次区域合作范围，包括湄公河流域老挝、缅甸、柬埔寨、泰国、越南五国和中国云南省，涉及7个合作领域，即：交通、能源、电讯、环境、旅游、人力资源开发以及贸易与投资。该合作机制分为两个层次，其一是部长级会议，自1992年起每年一次，至今已举行过10次。其二是司局级高官会议和各领域的论坛（交通、能源、电讯）和工作组会议（环境、旅游、贸易与投资），每年分别举行会议，并向部长级会议报告。
　　亚洲开发银行大湄公河次区域合作是湄公河开发三个国际合作机制中起步较早，并取得实质性进展的机制。自1992年迄今，亚洲开发银行为湄公河流域国家的基础设施建设累计提供贷款7.7亿美元，帮助融资2.3亿美元，已经在运输和能源领域完成了9个项目。9年多来，亚洲开发银行还向大湄公河次区域开发项目提供了32个、累计2500万美元的技术援助。亚行除向湄公河开发项目提供技术援助外，还利用自身的影响和担保作用，呼吁西方发达国家尤其是私人投资者为这些备选项目提供融资。湄公河沿岸各国政府也十分重视亚洲开发银行大湄公河次区域合作项目。目前亚洲开发银行大湄公河次区域合作的重点是加强次区域的基础设施建设和有关贸易投资政策等软环境建设。
　　大湄公河次区域经济合作以项目为主导，比较务实。到2005年，六个成员国在交通、能源、电信、环境、人力资源开发、投资、贸易、旅游、农业等领域实施了119个合作项目，动员资金总额约53亿美元。其中，贷款项目19个，投资近52亿美元；技术援助项目100个，赠款金额超过1亿美元。这些项目对次区域各国经济社会发展起到了重要推动作用。2001年第10次部长级会议通过了《大湄公河次区域经济合作未来10年战略框架》，提出了建设重要交通走廊、电信骨干网、电力联网与投资、贸易、旅游等11大标志性项目。
　　亚洲开发银行是大湄公河次区域经济合作的主要出资方，负责筹措各类资金和提供各种技术援助。迄今为止，亚行共提供项目贷款14亿美元，技术援助6000万美元。